सेल्युलोज एसीटेट मेम्ब्रेन इलेक्ट्रोफोरेसीसद्वारे सीरम प्रोटीन वेगळे करण्याचा प्रयोग

तत्त्व

सेल्युलोज एसीटेट फिल्म इलेक्ट्रोफोरेसीस ही एक इलेक्ट्रोफोरेसीस पद्धत आहे जी सेल्युलोज एसीटेट फिल्मला आधार म्हणून वापरते.विद्युत क्षेत्राच्या क्रियेखाली चार्ज केलेले कण विरुद्ध इलेक्ट्रोडकडे सरकतात त्या घटनेला इलेक्ट्रोफोरेसीस म्हणतात.प्रत्येक प्रथिनाचा विशिष्ट समविद्युत बिंदू असल्यामुळे, प्रथिने त्याच्या समविद्युत बिंदूपेक्षा कमी pH असलेल्या द्रावणात ठेवल्यास, प्रथिने सकारात्मक चार्ज होईल आणि नकारात्मक इलेक्ट्रोडकडे जाईल.उलटपक्षी, ते सकारात्मक ध्रुवाकडे जाते.विद्युत क्षेत्रात फिरणाऱ्या प्रथिनांच्या रेणूंचा वेग त्यांच्या चार्ज, रेणूंचा आकार आणि आकार यांच्याशी संबंधित असल्यामुळे इलेक्ट्रोफोरेसीसद्वारे वेगवेगळी प्रथिने वेगळी करता येतात.सीरममध्ये विविध प्रकारचे प्रथिने असतात, त्या सर्वांचे समविद्युत बिंदू pH7.5 किंवा त्याहून कमी असतात.इलेक्ट्रोफोरेसीस चालविण्यासाठी जेव्हा सीरम pH 8.6 बफरमध्ये ठेवले जाते, तेव्हा सर्व सीरम प्रथिने नकारात्मक चार्ज होतात आणि विद्युत क्षेत्रामध्ये सकारात्मक बाजूकडे जातात.विविध सीरम प्रथिनांचे समान pH वर वेगवेगळे शुल्क असल्याने, आण्विक कण आकारात भिन्न असतात, आणि अशा प्रकारे स्थलांतराचा वेग भिन्न असतो आणि ते इलेक्ट्रोफोरेसीसद्वारे वेगळे केले जातात.सीरम प्रथिनांचे आयसोइलेक्ट्रिक बिंदू आणि आण्विक वजन खालील तक्त्यामध्ये दर्शविले आहेत:

सेल्युलोज एसीटेट मेम्ब्रेन (abbr. CAM) सह रक्ताच्या सीरममधील भिन्न प्रथिने सपोर्ट मीडिया म्हणून वेगळे करणे हा प्रयोग आहे.सीएएम हा एक प्रकारचा फोमेड लूज आहेeचांगली एकसमान असलेली फिल्म, आणि जाडी 0.1 मिमी-1.5 मिमी आहे, ज्यामध्ये विशिष्ट पाणी शोषण आहे.

सीएएम इलेक्ट्रोफोरेसीससाठी साहित्य, उपकरणे आणि अभिकर्मक

नमुने:निरोगी मानवी रक्त सीरम

साधन:वीज पुरवठा DYY-6C, इलेक्ट्रोफोरेसीस टाकी DYCP-38C, उत्कृष्ट नमुना लोडिंग WD-9404

अभिकर्मक

1) सेल्युलोज एसीटेट झिल्ली 7X9cm

2) PH 8.6 बार्बिटॉल बफर सोल्यूशन (आयनिक ताकद 0.05-0.09, 0.06 वेळ आहे.): 1,84g डायथिल बार्बिट्यूरिक ऍसिड घ्या आणि नंतर 1.03 ग्रॅम डायथिल सोडियम पेंटोबार्बिटल घ्या, विरघळण्यासाठी गरम करण्यासाठी थोडे डिस्टिल्ड पाणी घाला आणि तयार करा. 1000 मिली पर्यंत;

3) डाग: Ponceau S 0.2g, Trichloroacetic 3g, 100ml डिस्टिल्ड वॉटर घाला;

4) TBS/T किंवा PBS/T: 45ml 95% इथेनॉल, 5ml ग्लेशियल ऍसिटिक ऍसिड, 50ml डिस्टिल्ड वॉटर घाला;

5) क्लीनिंग सोल्युशन: 70ml निर्जल इथेनॉल, 30ml ग्लेशियल ऍसिटिक ऍसिड.

मेथोचा प्रयोग कराd

1) पडदा तयार करा: बार्बिटोल बफर द्रावण 30min-8h मध्ये पडदा बुडवा, आणि ते बाहेर काढा, शोषक कागदाद्वारे अतिरिक्त द्रावण काढून टाका.

2) नमुने लोड करणे: पडद्याच्या खडबडीत बाजू आणि गुळगुळीत बाजू वेगळे करा आणि खडबडीत बाजूच्या वरच्या टोकापर्यंत 1.5 सेमी अंतरावर एक रेषा चिन्हांकित करा.खडबडीत बाजूने उत्कृष्ट नमुना लोडिंग साधनाद्वारे नमुने लोड करा.टीप: नमुने पडद्याच्या खडबडीत बाजूने लोड केले पाहिजेत.सीरमचे नमुने झिल्लीमध्ये पूर्णपणे घुसल्यानंतर, पडदा उलटा, खडबडीत बाजू (नमुन्यांसह) टाकीकडे तोंडावर ठेवा आणि नमुन्यांसह शेवट नकारात्मक इलेक्ट्रोडमध्ये ठेवा.

3) इलेक्ट्रोफोरेसीस: वीज पुरवठा चालू करा, 0.4～0.6m A/cm पडदा, चालण्याची वेळ 30-45 मिनिटे आहे.इलेक्ट्रोफोरेसीस चालवल्यानंतर, वीज बंद करा.

4) डाग आणि साफ करा: टाकीतून पडदा बाहेर काढा आणि विसर्जन कराit 5 मिनिटांसाठी डाई सोल्युशनमध्ये ठेवा आणि नंतर पार्श्वभूमीचा रंग स्पष्ट होईपर्यंत 3-4 वेळा साफसफाईच्या द्रावणात स्वच्छ करा.सीरम प्रथिने पट्ट्यांवर दर्शविले जावेत, आणि सामान्यत: चिन्हांकित रेषेच्या वरच्या टोकापर्यंत पाच झोन असतात, अल्ब्युमिन, α1-ग्लोलिन, α2-ग्लोलिन, β-ग्लोलिन, γ-ग्लोलिन.

5) संरक्षण: कोरडे इलेक्ट्रोफोरेसीस ठेवाबँड10-15 मिनिटे क्लिनिंग सोल्युशनमध्ये ठेवा आणि नंतर ते बाहेर काढा आणि स्वच्छ काचेवर चिकटवा, ते कोरडे झाल्यानंतर ते पारदर्शक फिल्म बनतेबँड.

प्रयोगपरिणाम

सीरम नमुन्यांचा पृथक्करण प्रभाव चांगला आहे आणि बँड टेलिंगची कोणतीही घटना नाही.चाचणी प्रक्रिया आणि प्रयोगकर्त्याच्या पद्धतींमुळे निकालांची पुनरावृत्तीक्षमता बदलते आणि पुनरावृत्तीक्षमता जास्त असते.

निष्कर्ष

जलद क्लिनिकल इलेक्ट्रोफोरेसीस डिटेक्शन सिस्टम (इलेक्ट्रोफोरेसीस टाकीDYCP-38C,वीज पुरवठाDYY-6C आणि उत्कृष्ट नमुना लोडिंग WD-9404) आमच्याद्वारे उत्पादितकंपनी बीजिंग लियूई बायोटेक्नॉलॉजी कं, लिप्रायोगिक आवश्यकता पूर्ण करते,आणिपरिणाम पुनरुत्पादक, साधे आणि जलद, योग्य आहेतशिक्षणसंशोधन.

बीजिंग लियुईबायोटेक्नॉलॉजी कं, लिमिटेड जीवन विज्ञान उद्योगासाठी इलेक्ट्रोफोरेसीस उत्पादने तयार करण्यात माहिर आहे, जेचीनमध्ये 50 वर्षांपेक्षा जास्त इतिहास आहे आणि कंपनी जगभरात स्थिर आणि उच्च-गुणवत्तेची उत्पादने देऊ शकते.विकासाच्या वर्षांच्या माध्यमातून, ते आपल्या पसंतीस पात्र आहे!

आम्ही आता भागीदार शोधत आहोत, OEM इलेक्ट्रोफोरेसीस टाकी आणि वितरक दोघांचेही स्वागत आहे.

आमच्याबद्दल अधिक माहितीसाठी, कृपया ईमेलद्वारे आमच्याशी संपर्क साधा[ईमेल संरक्षित]किंवा[ईमेल संरक्षित].