जेल इलेक्ट्रोफोरेसीस ऑप्टिमाइझ करणे: नमुना व्हॉल्यूम, व्होल्टेज आणि वेळेसाठी सर्वोत्तम पद्धती

परिचय

जेल इलेक्ट्रोफोरेसीस हे आण्विक जीवशास्त्रातील एक मूलभूत तंत्र आहे, प्रथिने, न्यूक्लिक ॲसिड आणि इतर मॅक्रोमोलेक्यूल्स वेगळे करण्यासाठी मोठ्या प्रमाणावर वापरले जाते. अचूक आणि पुनरुत्पादक परिणाम प्राप्त करण्यासाठी नमुना व्हॉल्यूम, व्होल्टेज आणि इलेक्ट्रोफोरेसीस वेळेचे योग्य नियंत्रण महत्वाचे आहे.आमचा प्रयोगशाळा सहकारी ऑफर करतोSDS-PAGE जेल इलेक्ट्रोफोरेसीस दरम्यान हे पॅरामीटर्स व्यवस्थापित करण्यासाठी सर्वोत्तम पद्धती.

3

बीजिंग Liuyi बायोटेक्नॉलॉजी जेल इलेक्ट्रोफोरेसीस उत्पादने

नमुना खंड: सुसंगतता सुनिश्चित करणे

SDS-PAGE इलेक्ट्रोफोरेसीस करत असताना, नमुना व्हॉल्यूम हा एक महत्त्वाचा घटक आहे जो तुमच्या परिणामांच्या रिझोल्यूशनवर लक्षणीय परिणाम करू शकतो. साधारणपणे प्रति विहिरीत एकूण प्रथिने 10 μL लोड करण्याची शिफारस केली जाते. सुसंगतता सुनिश्चित करण्यासाठी आणि जवळच्या विहिरींमधील नमुना प्रसार रोखण्यासाठी, कोणत्याही रिकाम्या विहिरींमध्ये 1x लोडिंग बफरच्या समान प्रमाणात लोड करणे महत्वाचे आहे. ही खबरदारी शेजारच्या गल्ल्यांमध्ये नमुने पसरण्यापासून रोखण्यास मदत करते, जे विहीर रिकामी ठेवल्यास होऊ शकते.

तुमचे नमुने लोड करण्यापूर्वी, नेहमी एका विहिरीत आण्विक वजन मार्कर जोडून सुरुवात करा. हे इलेक्ट्रोफोरेसीस नंतर प्रथिने आकार सहज ओळखण्यास अनुमती देते.

१

व्होल्टेज नियंत्रण: गती आणि रिझोल्यूशन संतुलित करणे

इलेक्ट्रोफोरेसीस दरम्यान लागू होणारा व्होल्टेज जेलमधून नमुने स्थलांतरित होण्याच्या गती आणि विभक्त होण्याच्या रिझोल्यूशनवर थेट परिणाम करतो. SDS-PAGE साठी, सुमारे 80V च्या कमी व्होल्टेजसह प्रारंभ करणे उचित आहे. या सुरुवातीच्या कमी व्होल्टेजमुळे नमुने विभक्त जेलमध्ये प्रवेश केल्यावर त्यांना एका धारदार बँडमध्ये केंद्रित करून हळूहळू आणि समान रीतीने स्थलांतरित होऊ देते.

एकदा नमुने पूर्णपणे विभक्त जेलमध्ये प्रवेश केल्यावर, व्होल्टेज 120V पर्यंत वाढवता येते. हे उच्च व्होल्टेज स्थलांतराला गती देते, हे सुनिश्चित करते की प्रथिने त्यांच्या आण्विक वजनानुसार कार्यक्षमतेने विभक्त होतात. ब्रोमोफेनॉल ब्लू डाई फ्रंटच्या प्रगतीचे निरीक्षण करणे आवश्यक आहे, जे इलेक्ट्रोफोरेसीस पूर्ण झाल्याचे सूचित करते. 10-12% च्या एकाग्रतेसह जेलसाठी, 80-90 मिनिटे पुरेशी असतात; तथापि, 15% जेलसाठी, तुम्हाला रन टाइम किंचित वाढवावा लागेल.

वेळ व्यवस्थापन: कधी थांबायचे हे जाणून घेणे

जेल इलेक्ट्रोफोरेसीसमध्ये वेळ हा आणखी एक महत्त्वाचा घटक आहे. जेल खूप लांब किंवा खूप कमी कालावधीसाठी चालवण्यामुळे सबऑप्टिमल वेगळे होऊ शकते. ब्रोमोफेनॉल ब्लू डाईचे स्थलांतर हे एक उपयुक्त सूचक आहे: जेव्हा ते जेलच्या तळाशी पोहोचते तेव्हा सहसा धावणे थांबवण्याची वेळ येते. मानक जेलसाठी, जसे की 10-12%, सुमारे 80-90 मिनिटांचा इलेक्ट्रोफोरेसीस कालावधी सामान्यतः पुरेसा असतो. उच्च टक्केवारीच्या जेलसाठी, जसे की 15%, प्रथिने पूर्णपणे वेगळे करणे सुनिश्चित करण्यासाठी धावण्याची वेळ वाढविली पाहिजे.

बफर व्यवस्थापन: बफर पुन्हा वापरणे आणि तयार करणे

तुमच्या प्रयोगशाळेच्या विशिष्ट परिस्थितीनुसार, इलेक्ट्रोफोरेसीस बफर 1-2 वेळा पुन्हा वापरला जाऊ शकतो. तथापि, इष्टतम परिणामांसाठी, ताजे 10x बफर तयार करण्याची आणि वापरण्यापूर्वी ते पातळ करण्याची शिफारस केली जाते. हे सुनिश्चित करते की बफर त्याची प्रभावीता टिकवून ठेवते, ज्यामुळे अधिक विश्वसनीय इलेक्ट्रोफोरेसीस परिणाम होतात.

2

बीजिंग Liuyi बायोटेक्नॉलॉजी जेल इलेक्ट्रोफोरेसीस उत्पादने

नमुना व्हॉल्यूम, व्होल्टेज आणि इलेक्ट्रोफोरेसीस वेळ काळजीपूर्वक नियंत्रित करून, तुम्ही तुमच्या जेल इलेक्ट्रोफोरेसीस परिणामांची अचूकता आणि पुनरुत्पादकता लक्षणीयरीत्या सुधारू शकता. तुमच्या प्रयोगशाळेच्या कामात या सर्वोत्तम पद्धती लागू केल्याने तुम्हाला स्पष्ट आणि अधिक वेगळे बँड मिळण्यास मदत होईल, ज्यामुळे डाउनस्ट्रीम विश्लेषणासाठी चांगला डेटा मिळेल.

जेल इलेक्ट्रोफोरेसीस प्रयोग ऑप्टिमाइझ करण्यासाठी तुमच्याकडे अधिक चांगल्या पद्धती असल्यास, आमच्याशी चर्चा करण्यासाठी स्वागत आहे!

बीजिंग Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) ने आमच्या स्वतःच्या व्यावसायिक तांत्रिक टीम आणि R&D केंद्रासोबत 50 वर्षांहून अधिक काळ इलेक्ट्रोफोरेसीस उपकरणे तयार करण्यात विशेष कौशल्य प्राप्त केले आहे. आमच्याकडे डिझाईनपासून तपासणीपर्यंत आणि वेअरहाऊस, तसेच विपणन समर्थनापर्यंत विश्वसनीय आणि संपूर्ण उत्पादन लाइन आहे. आमची मुख्य उत्पादने म्हणजे इलेक्ट्रोफोरेसिस सेल (टँक/चेंबर), इलेक्ट्रोफोरेसिस पॉवर सप्लाय, ब्लू एलईडी ट्रान्सिल्युमिनेटर, यूव्ही ट्रान्सिल्युमिनेटर, जेल इमेज आणि ॲनालिसिस सिस्टीम इ. आम्ही प्रयोगशाळेसाठी पीसीआर इन्स्ट्रुमेंट, व्हर्टेक्स मिक्सर आणि सेंट्रीफ्यूज सारखी लॅब उपकरणे देखील पुरवतो.

आमच्या उत्पादनांसाठी तुमच्याकडे कोणतीही खरेदी योजना असल्यास, कृपया आमच्याशी संपर्क साधण्यास अजिबात संकोच करू नका. तुम्ही आम्हाला ईमेलवर संदेश पाठवू शकता[ईमेल संरक्षित]किंवा[ईमेल संरक्षित], किंवा कृपया आम्हाला +86 15810650221 वर कॉल करा किंवा Whatsapp +86 15810650221, किंवा Wechat: 15810650221 जोडा.

कृपया Whatsapp किंवा WeChat वर जोडण्यासाठी QR कोड स्कॅन करा.

2


पोस्ट वेळ: ऑगस्ट-20-2024