Agarose जेल इलेक्ट्रोफोरेसीसची मूलभूत तंत्रे(2)

नमुना तयार करणे आणिलोड करत आहे

बहुतेक प्रकरणांमध्ये जेल स्टॅकिंगशिवाय सतत बफर सिस्टम वापरल्यामुळे, नमुन्यांमध्ये योग्य एकाग्रता आणि लहान व्हॉल्यूम असणे आवश्यक आहे. वापरा aपिपेटरेझोल्यूशनमध्ये लक्षणीय घट टाळण्यासाठी 5-10 μg प्रति विहिरीसह नमुना हळूहळू जोडण्यासाठी. जेव्हानमुना लोड करत आहे, वीज पुरवठा बंद करणे आवश्यक आहे. नमुन्यात त्याची घनता वाढवण्यासाठी, नमुना एकाग्र करण्यासाठी आणि प्रसार रोखण्यासाठी सूचक रंग (0.025% ब्रोमोफेनॉल निळा किंवा नारिंगी) आणि सुक्रोज (10-15%) किंवा ग्लिसरॉल (5-10%) असावा. तथापि, काहीवेळा सुक्रोज किंवा ग्लिसरॉल इलेक्ट्रोफोरेसीस परिणामांमध्ये U-आकाराचे बँड होऊ शकतात, जे 2.5% Ficoll (पॉलीविनाइलपायरोलिडोन) वापरून टाळता येऊ शकतात.

१

इलेक्ट्रोफोरेसीस

इलेक्ट्रोफोरेसीससाठी व्होल्टेज 5-15 V/cm आहे, साधारणपणे 10 V/cm. मोठ्या रेणूंच्या पृथक्करणासाठी, व्होल्टेज कमी असावे, सहसा 5 V/cm पेक्षा जास्त नसावे.

2

डाग पडणे

फ्लोरोसेंट डाई इथिडियम ब्रोमाइड (EB) सामान्यतः ॲग्रोज जेलमध्ये डीएनए बँडचे निरीक्षण करण्यासाठी डाग लावण्यासाठी वापरला जातो. ईबी डीएनए रेणूंच्या बेस जोड्यांमध्ये घालू शकतो, ज्यामुळे ईबी डीएनएशी बांधला जातो. DNA द्वारे 260 nm अल्ट्राव्हायोलेट प्रकाशाचे शोषण EB मध्ये हस्तांतरित केले जाते आणि बद्ध EB दृश्यमान प्रकाश स्पेक्ट्रमच्या लाल-नारिंगी प्रदेशात 590 nm वर फ्लोरोसेन्स उत्सर्जित करते. जेलला 1 mmol/L MgSO4 सोल्युशनमध्ये 1 तासासाठी डाग केल्याने अनबाउंड EB मुळे होणारे पार्श्वभूमी फ्लूरोसेन्स कमी होऊ शकते, ज्यामुळे DNA ची कमी प्रमाणात ओळख होऊ शकते.

EB डाईचे अनेक फायदे आहेत: ते वापरण्यास सोपा आहे, न्यूक्लिक ॲसिड तोडत नाही, उच्च संवेदनशीलता आहे आणि DNA आणि RNA दोन्ही डाग करू शकतात. EB नमुन्यात जोडले जाऊ शकते आणि UV शोषण वापरून कधीही ट्रॅक केले जाऊ शकते. डाग पडल्यानंतर, एन-ब्युटानॉलच्या सहाय्याने निष्कर्षण करून ईबी काढला जाऊ शकतो.

तथापि, EB डाई एक शक्तिशाली उत्परिवर्तक आहे, आणि हाताळणी दरम्यान पॉलिथिलीन हातमोजे घालण्यासारखी खबरदारी घेतली पाहिजे. ऍक्रिडाइन ऑरेंज हा देखील सामान्यतः वापरला जाणारा रंग आहे कारण तो सिंगल-स्ट्रँडेड आणि डबल-स्ट्रँडेड न्यूक्लिक ॲसिड (DNA, RNA) मध्ये फरक करू शकतो. हे डबल-स्ट्रँडेड न्यूक्लिक ॲसिडसाठी हिरवे फ्लूरोसेन्स (530 एनएम) आणि सिंगल-स्ट्रँडेड न्यूक्लिक ॲसिडसाठी रेड फ्लूरोसेन्स (640 एनएम) प्रदर्शित करते. याव्यतिरिक्त, इतर रंग जसे की मिथिलीन ब्लू, मिथिलीन ग्रीन आणि क्विनोलिन बी हे डाग पडण्यासाठी वापरले जाऊ शकतात.

बीजिंग Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) ने आमच्या स्वतःच्या व्यावसायिक तांत्रिक टीम आणि R&D केंद्रासोबत 50 वर्षांहून अधिक काळ इलेक्ट्रोफोरेसीस उपकरणे तयार करण्यात विशेष कौशल्य प्राप्त केले आहे. आमच्याकडे डिझाईनपासून तपासणीपर्यंत आणि वेअरहाऊस, तसेच विपणन समर्थनापर्यंत विश्वसनीय आणि संपूर्ण उत्पादन लाइन आहे. आमची मुख्य उत्पादने म्हणजे इलेक्ट्रोफोरेसिस सेल (टँक/चेंबर), इलेक्ट्रोफोरेसीस पॉवर सप्लाय, ब्लू एलईडी ट्रान्सिल्युमिनेटर, यूव्ही ट्रान्सिल्युमिनेटर, जेल इमेज आणि ॲनालिसिस सिस्टम इ.

3

आम्ही आता भागीदार शोधत आहोत, OEM इलेक्ट्रोफोरेसीस टाकी आणि वितरक दोघांचेही स्वागत आहे.

आमच्या उत्पादनांसाठी तुमच्याकडे कोणतीही खरेदी योजना असल्यास, कृपया आमच्याशी संपर्क साधण्यास अजिबात संकोच करू नका. तुम्ही आम्हाला ईमेलवर संदेश पाठवू शकता[ईमेल संरक्षित]किंवा[ईमेल संरक्षित], किंवा कृपया आम्हाला +86 15810650221 वर कॉल करा किंवा Whatsapp +86 15810650221, किंवा Wechat: 15810650221 जोडा.

कृपया Whatsapp किंवा WeChat वर जोडण्यासाठी QR कोड स्कॅन करा.

2


पोस्ट वेळ: डिसेंबर-20-2023