1. वर्गीकरण
जेल इलेक्ट्रोफोरेसीस उभ्या प्रकारांमध्ये (स्तंभ जेल आणि स्लॅब जेलसह) आणि क्षैतिज प्रकार (प्रामुख्याने स्लॅब जेल) (आकृती 6-18) मध्ये विभागलेले आहे. सामान्यतः, उभ्या पृथक्करण आडव्यापेक्षा किंचित वरचे असते, परंतु क्षैतिज जेलच्या तयारीचे किमान चार फायदे आहेत: संपूर्ण जेलच्या खाली आधार आहे, कमी-सांद्रता ऍग्रोज वापरण्याची परवानगी देते; वेगवेगळ्या वैशिष्ट्यांच्या ऍग्रोज जेल प्लेट्स तयार करणे शक्य आहे; जेल तयार करणे आणि नमुना लोड करणे अधिक सोयीस्कर आहे; इलेक्ट्रोफोरेसीस चेंबर बांधणे सोपे आणि किफायतशीर आहे. क्षैतिज इलेक्ट्रोफोरेसीस ॲग्रोज जेल प्लेटने इलेक्ट्रोफोरेसिस बफरच्या पृष्ठभागाच्या सुमारे 1 मिमी खाली पूर्णपणे बुडवून केले जाते, याला सबमर्ज्ड इलेक्ट्रोफोरेसीस देखील म्हणतात.
ॲग्रोज जेल इलेक्ट्रोफोरेसीससाठी इलेक्ट्रोफोरेसीस टँक DYCP-31DN
2.बफर प्रणाली
न्यूक्लिक ॲसिड पृथक्करणामध्ये, बहुतेक प्रणाली सतत प्रणालींचा अवलंब करतात. सामान्यतः वापरल्या जाणाऱ्या इलेक्ट्रोफोरेसीस बफरमध्ये TBE (0.08mol/L Tris·HCl, pH 8.5, 0.08mol/L बोरिक ऍसिड, 0.0024mol/L EDTA) बफर आणि THE (0.04mol/L Tris·HCl, pH 7.8, 0.02mol/L) यांचा समावेश होतो. सोडियम एसीटेट, 0.0018mol/L EDTA) बफर. हे बफर सामान्यतः 10x स्टॉक सोल्यूशन म्हणून तयार केले जातात आणि वापरात असताना आवश्यक एकाग्रतेनुसार पातळ केले जातात. ॲग्रोज जेलमधील रेखीय आणि गोलाकार डीएनएचे स्थलांतर दर वापरलेल्या बफरनुसार बदलतात. बफरमध्ये, रेखीय DNA चे स्थलांतर दर वर्तुळाकार DNA पेक्षा जास्त आहे, तर TBE बफरमध्ये, उलट सत्य आहे.
3. Agarose जेलची तयारी
(1) Horizontal Agarose Gel तयार करणे
(a) 1x इलेक्ट्रोफोरेसीस बफर वापरून ॲग्रोज जेलची आवश्यक सांद्रता तयार करा.
(b) उकळत्या पाण्याच्या आंघोळीत, चुंबकीय ढवळत किंवा मायक्रोवेव्हमध्ये पूर्ण विरघळण्यासाठी आगरोज गरम करा. ॲग्रोजचे द्रावण 55°C पर्यंत थंड करा आणि 0.5 μg/ml च्या अंतिम एकाग्रतेत इथिडियम ब्रोमाइड (EB) डाई घाला.
(c) काचेच्या किंवा ऍक्रेलिक प्लेट्सच्या कडा थोड्या प्रमाणात ऍग्रोज जेलने सील करा, एक कंगवा घाला आणि कंगवाचे दात प्लेटच्या 0.5-1.0 मिमी वर ठेवा.
(d) वितळलेले ऍग्रोज जेलचे द्रावण सतत काचेच्या किंवा ऍक्रेलिक प्लेट मोल्डमध्ये ओतावे (जाडी DNA नमुन्याच्या आकारमानावर अवलंबून असते), हवेचे फुगे येऊ नयेत. खोलीच्या तपमानावर ते नैसर्गिकरित्या घट्ट होऊ द्या.
(e) पूर्ण घट्ट झाल्यानंतर कंगवा काळजीपूर्वक काढा. जेलच्या टाकीला योग्य प्रमाणात इलेक्ट्रोफोरेसीस बफर जोडा, जेल प्लेट इलेक्ट्रोफोरेसीस बफरच्या पृष्ठभागाच्या सुमारे 1 मिमी खाली बुडलेली आहे याची खात्री करा.
(२) वर्टिकल ऍगारोस जेल तयार करणे
(a) इथेनॉलने धुवून काचेच्या प्लेट्समधील वंगण किंवा अवशेष काढून टाका.
(b) स्पेसर प्लेट्स पुढच्या आणि मागच्या डॅममध्ये ठेवा, स्पेसर प्लेट्सच्या कडा पुढच्या आणि मागच्या डॅमसह संरेखित करा आणि त्यांना क्लॅम्पसह सुरक्षित करा.
(c) जेल कास्टिंग चेंबरच्या तळाशी 1 सेमी उंच ॲग्रोज प्लग तयार करण्यासाठी स्पेसर प्लेट्सच्या कडांमध्ये 1x बफरमध्ये 2% ॲग्रोज घाला.
(d) 1x बफरमध्ये तयार केलेले वितळलेले ऍग्रोज जेल, इच्छित एकाग्रतेवर, वरच्या खाली 1 सेमी पर्यंत जेल चेंबरमध्ये घाला.
(e) कंगवा दाताखाली हवा बुडबुडे अडकणे टाळून कंघी घाला. काहीवेळा, ॲग्रोज जेल थंड करताना कंघीच्या दातांवर सुरकुत्या दिसू शकतात; अशा परिस्थितीत, ते घट्ट करण्यासाठी वरच्या बाजूला थोडे वितळलेले अग्रोज घाला.
(f) कंगवा काढा. लोडिंग स्लॉटमध्ये बफर लीकेज टाळण्यासाठी, ॲग्रोज जेल प्लेट आणि इलेक्ट्रोफोरेसीस चेंबरमधील कनेक्शन 2% ॲग्रोजसह सील करा आणि आवश्यक प्रमाणात बफर घाला.
(g) जेल चेंबरमध्ये 1x इलेक्ट्रोफोरेसीस बफर जोडा.
(h) बफरच्या खाली असलेल्या ॲग्रोज जेलवर DNA नमुने काळजीपूर्वक लोड करा.
ऍग्रोज जेल इलेक्ट्रोफोरेसीस बद्दल मूलभूत ज्ञानाबद्दल अधिक माहिती, आम्ही पुढील आठवड्यात सामायिक करू. ही माहिती तुमच्या प्रयोगासाठी उपयुक्त ठरेल अशी इच्छा आहे.
बीजिंग Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) ने आमच्या स्वतःच्या व्यावसायिक तांत्रिक टीम आणि R&D केंद्रासोबत 50 वर्षांहून अधिक काळ इलेक्ट्रोफोरेसीस उपकरणे तयार करण्यात विशेष कौशल्य प्राप्त केले आहे. आमच्याकडे डिझाईनपासून तपासणीपर्यंत आणि वेअरहाऊस, तसेच विपणन समर्थनापर्यंत विश्वसनीय आणि संपूर्ण उत्पादन लाइन आहे. आमची मुख्य उत्पादने म्हणजे इलेक्ट्रोफोरेसिस सेल (टँक/चेंबर), इलेक्ट्रोफोरेसीस पॉवर सप्लाय, ब्लू एलईडी ट्रान्सिल्युमिनेटर, यूव्ही ट्रान्सिल्युमिनेटर, जेल इमेज आणि ॲनालिसिस सिस्टम इ.
आम्ही आता भागीदार शोधत आहोत, OEM इलेक्ट्रोफोरेसीस टाकी आणि वितरक दोघांचेही स्वागत आहे.
आमच्या उत्पादनांसाठी तुमच्याकडे कोणतीही खरेदी योजना असल्यास, कृपया आमच्याशी संपर्क साधण्यास अजिबात संकोच करू नका. तुम्ही आम्हाला ईमेलवर संदेश पाठवू शकता[ईमेल संरक्षित]किंवा[ईमेल संरक्षित], किंवा कृपया आम्हाला +86 15810650221 वर कॉल करा किंवा Whatsapp +86 15810650221, किंवा Wechat: 15810650221 जोडा.
कृपया Whatsapp किंवा WeChat वर जोडण्यासाठी QR कोड स्कॅन करा.
पोस्ट वेळ: डिसेंबर-०७-२०२३